PCR實驗室建設(shè)安裝方案

PCR實驗室分為四個單獨的工作區(qū)域：試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增反應(yīng)混合物配制和擴(kuò)增區(qū)、擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)；為避免交叉污染，進(jìn)入各個工作區(qū)域必須嚴(yán)格遵循單一方向進(jìn)行，即只能從試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)→標(biāo)本制備區(qū)→擴(kuò)增反應(yīng)混合物配制和擴(kuò)增區(qū)→擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)；各實驗區(qū)之間的試劑及樣品傳遞應(yīng)通過傳遞窗進(jìn)行；PCR實驗室為避免各個實驗區(qū)域間交叉污染的可能性，宜采用全送全排的氣流組織形式，同時要嚴(yán)格控制送、排風(fēng)的比例以保證各實驗區(qū)的壓力要求。

試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)：該實驗區(qū)主要進(jìn)行的操作為貯存試劑的制備、試劑的分裝和主反應(yīng)混合液的制備，試劑和用于標(biāo)本制作的材料應(yīng)直接運送至該區(qū)，不得經(jīng)過其他區(qū)域；試劑原材料須貯存在本區(qū)內(nèi)，并在本區(qū)內(nèi)制備成所需的貯存試劑。標(biāo)本制備區(qū)：該區(qū)域主要進(jìn)行的操作為臨床標(biāo)本的保存、核酸RNA、DNA提取、貯存及其加入至擴(kuò)增反應(yīng)管和測定RNA時cDNA的合成；本區(qū)的壓力梯度要求為：相對于鄰近區(qū)域為正壓，以避免從鄰近區(qū)進(jìn)入本區(qū)的氣溶膠污染；由于在加樣操作中可能會發(fā)生氣溶膠所致的污染，所以應(yīng)避免在本區(qū)內(nèi)不必要的走動。

  擴(kuò)增反應(yīng)混合物配制和擴(kuò)增區(qū)：該區(qū)域主要進(jìn)行的操作為DNA或 cDNA擴(kuò)增，已制備的DNA模板和合成的cDNA的加入和主反應(yīng)混合液制備成反應(yīng)混合液等也可在本區(qū)內(nèi)進(jìn)行；相對于鄰近區(qū)域為負(fù)壓，以避免氣溶膠從本區(qū)漏出；為避免氣溶膠所致的污染，應(yīng)盡量減少在本區(qū)內(nèi)的不必要的走動，個別操作如加樣等應(yīng)在超凈臺內(nèi)進(jìn)行。擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū): 該區(qū)域主要進(jìn)行的操作為擴(kuò)增片段的測定，如使用全自動封閉分析儀器檢測，此區(qū)域可不設(shè)；本區(qū)是最主要的擴(kuò)增產(chǎn)物污染來源，因此對本區(qū)的壓力梯度的要求為：相對于鄰近區(qū)域為負(fù)壓，以避免擴(kuò)增產(chǎn)物從本區(qū)擴(kuò)散至其它區(qū)域。中凈環(huán)球凈化可提供PCR實驗室、微生物實驗室的咨詢、規(guī)劃、設(shè)計、施工、安裝、改造等配套服務(wù)。

PCR各個實驗區(qū)域須設(shè)置合理，各個實驗區(qū)域要有明顯的標(biāo)記，如醒目的門牌或不同的地面顏色等，以避免各個不同實驗區(qū)域設(shè)備物品、試劑等發(fā)生混淆；合理的空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)設(shè)置，盡量采用全送全排的空調(diào)系統(tǒng)；嚴(yán)格的氣流壓力控制，保證不同的實驗區(qū)內(nèi)不同的壓力要求；在實驗操作過程中，操作者必須戴手套，并經(jīng)常更換，此外操作中使用一次性帽子也是一個有效地防止污染的措施；實驗工作結(jié)束后，須立即對本區(qū)進(jìn)行清潔，除常規(guī)的消毒液體對表面進(jìn)行擦拭消毒或紫外線燈的照射消毒外，對一些實驗設(shè)備還應(yīng)進(jìn)行高壓消毒處理；嚴(yán)格控制進(jìn)出實驗室的人員，與實驗無關(guān)的人員不得隨意進(jìn)出實驗室，有條件的情況下要設(shè)置獨立的通道和進(jìn)出整個實驗區(qū)的門；在各個實驗區(qū)域使用帶有明顯區(qū)別標(biāo)志的工作服如不同顏色，當(dāng)工作人員離開時不得將本區(qū)的工作服帶至其它區(qū)域；盡量減少在實驗區(qū)內(nèi)不必要的走動以減少交叉污染的可能性；擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)是最主要的擴(kuò)增產(chǎn)物污染來源，廢液不能在實驗室中傾倒，須經(jīng)消毒液浸泡消毒后在遠(yuǎn)離實驗室的地方棄掉，用過的吸頭等一次性材料也應(yīng)經(jīng)消毒液浸泡消毒后統(tǒng)一處理。

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